Principios de análisis instrumental
376 Capítulo 15 Espectrometría molecular por luminiscencia {(( }} PREGUNTAS YPROBLEMAS (continuación) O~f)OH ~ 1 ~ e a) (rco,H fenolftaleína o,o' -dihidroxiazobenceno ftuoresceína • ;;--{OH N -N HOh ~ 1 1 ~---- H H bis(o-hidroxifenil)hidrazina 15.5 ¿Por qué algunos compuestos absorbentes manifiestan fluorescencia y otros no? 15.6 Analice las principales razones por las cuales la espectrometría de fosforescencia molecular no se utiliza tan ampliamente como la espectrometría de fluorescencia molecular. El§! 15.7 La forma reducida del dinucleótido de adenina y nicotinamida (NADH) es una importante coenzima muy fluorescente. Tiene un máximo de absorción de 340 nm y un máximo de emisión de 465 nm. Unas disoluciones patrón de NADH dieron las intensidades de fluorescencia siguientes: Corre. NADH, ¡.tmol!L 0.100 0.200 0.300 0.400 0.500 0.600 0.700 0.800 Intensidad relativa 2.24 4.52 6.63 9.01 10.94 13.71 15.49 17.91 a) Construya una hoja de cálculo y utilícela para trazar una curva de calibración para el NADH. *b) Calcule mediante mínimos cuadrados la pendiente y la ordenada al origen de la gráfica de a). e) Calcule la desviación estándar de la pendiente y la desviación estándar respecto a la regresión de la curva. *d) Una solución problema presenta una intensidad de fluorescencia relativa de 12.16. Determine me– diante la hoj a de cálculo la concentración de NADH. * e) Calcule la desviación estándar relativa del resultado del inciso d). f) Calcule la desviación estándar relativa del resultado del inciso d) si la lectura 7.95 fue la media de tres medidas.
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