Principios de análisis instrumental

794 Capítulo 30 Electroforesis capilar, electrocromatografía capilar y fraccionamiento por flujo y campo <« }} PREGUNTAS YPROBLEMAS *Las respuestas de los problemas marcados con un asterisco se proporcionan al final del libro. Dsl Los problemas que contienen este símbolo se resuelven mejor con hojas de cálculo. 30.1 ¿Qué es el flujo electroosmótico?, ¿por qué tiene lugar? 30.2 Sugiera una manera para suprimir el flujo electroosmótico. 30.3 ¿Por qué el pH afecta a las separaciones de aminoácidos por electroforesis? 30.4 ¿Cuál es el fundamento de la separación por electroforesis capilar de zona? * 30.5 Cierto catión inorgánico tiene una movilidad electroforética de 5.27 X 10- 4 cm 2 s - J V - J. El coeficiente de difusión de este mismo ion es de 9.5 X 10- 6 cm 2 s- 1 • Si este ion se separa de otros cationes mediante electroforesis capilar de zona con un capilar de 50.0 cm, ¿cuál es la cantidad de platos N que podría esperarse si se aplica un voltaje de a) 10.0 kV? b) 20.0 kV? e) 30.0 kV? * 30.6 El analito catiónico del problema 30.5 fue separado mediante electroforesis capilar de zona en un capilar de 50.0 cm a 10.0 kV. En condiciones de separación, el caudal electroosmótico fue de 0.85 mm s- 1 hacia el cátodo. Si el detector se localizara a 45.0 cm del extremo de inyección del capilar, ¿cuánto tardaría, en minutos, el catión del analito en llegar al detector después de aplicar el campo? 30.7 ¿Cuál es el fundamento de la cromatografía capilar micelar electrocinética?, ¿en qué se diferencia de la electroforesis capilar de zona? 30.8 Describa una ventaja importante de la cromatografía capilar micelar electrocinética respecto a la cromatografía líquida ordinaria. 30.9 Se ionizan tres proteínas grandes al pH en el cual se efectúa la separación mediante la técnica de FFC eléctrico. Si los iones se designan A z+, B+y C 3 +, pronostique el orden de elución. 30.10 ¿Qué determina el orden de elución en el FFC de sedimentación? 30.11 Elabore una lista de las principales ventajas y limitaciones del FFC en comparación con los métodos cromatográficos. Problema de reto Dsl 30.12 La doxorrubicina (DOX) es una antraciclina ampliamente utilizada que es muy eficaz en los tratamientos contra la leucemia y el cáncer de mama en seres humanos (A. B. Anderson, C. M. Ciriaks, K. M. Fuller y E. A. Ariaga, Anal. Chem., 2003, 75, p. 8, DOI: 10.1021/ac020426r). Por desgracia, se sabe que causa efectos secundarios como intoxicación del hígado y resistencia a los fármacos . En un estudio reciente, Anderson y sus colaboradores utilizaron fluorescencia inducida por rayo láser como método de detección en la electroforesis capilar para investigar los metabolitos de DOX en la célula y en fracciones de ella. En la tabla siguiente se muestran resultados similares a los que Anderson y sus colaboradores obtuvieron en la cuantificación de la doxorrubicina mediante fluorescencia inducida por rayo láser. Las áreas del pico de electroforesis capilar se midieron en función de la concentración de DOX para elaborar una curva de calibración. Concentración de DOX, nM Área de pico 0.10 0.10 1.00 0.80 5.00 4.52 10.00 8.32 20.00 15.7 30.00 26.2 50.00 41.5