Principios de análisis instrumental

que la disminución en el tamaño de la partícula del relleno causa importantes mejoras de H. En el caso de fases móviles líquidas, en las que B/u por lo regular es insignificante, se pueden conseguir menores alturas de plato al reducir la viscosidad del disolvente y, por tanto, aumentando el coeficiente de difusión en la fase móvil. Variación del factor de retención Muchas veces una separación puede mejorar de manera impor– tante al manipular el factor de retención ka. Por lo general, los incrementos de k 8 aumentan la resolución, pero a expensas del tiempo de elución. Para determinar el intervalo óptimo de los valores de k 8 , es conveniente escribir la ecuación 26.25 de la manera Qka R = -- ' 1 + k 8 VN(a- 1) , donde Q = - 4 - --a- y la ecuacion 26.29 es donde Q' = 16R;H(_a_) 2 u a- 1 La figura 26.13 es una gráfica de R 5 /Q y de(tR)s/Q ' en función de ka, suponiendo que Q y Q' permanecen casi constantes. Observe que los valores de k 8 mayores que 10 tienen que evitarse debido a que proporcionan poco aumento en la resolución, pero sí un marcado incremento del tiempo necesario para las separaciones. El mínimo en la curva del tiempo de elución se nota en un valor de a) 70% metanoil 30% agua b) e) >» 260 Optimización del desempeño de La columna 693 [ o Factor de retención, k 8 FIGURA 26.13 Influencia del factor de retención ka en La resolución R, y en el tiempo de elución (tR)a. Se supone que a y Q' permanecen constantes al variar ka. ka de alrededor de 2. Las curvas de la figura 26.13 apuntan a que el valor óptimo de k 8 , teniendo en cuenta tanto la resolución como el tiempo de elución, se encuentra en el intervalo de 1 a S. Por lo general, la forma más fácil de mejorar la resolución es haciendo óptimo el valor de k. Con fases móviles gaseosas, k puede mejorarse si se cambia la temperatura. En el caso de fases móviles líquidas, el cambio en la composición del disolvente per– mite manipular k para obtener mejores separaciones. En la figura 26.14 se muestra un ejemplo del efecto espectacular que puede ocasionar un cambio relativamente pequeño en la composición del disolvente. Los cuatro cromatogramas muestran la manera en la que variaciones moderadas en la relación metanol-agua con– vierten cromatogramas insatisfactorios (a y b) en unos donde los picos de cada uno de los componentes se encuentran bien sepa– rados (e y d). Para la mayoría de los fines, el cromatograma que se muestra en e) es el mejor debido a que presenta una resolución 60% metanol/ 40% agua 50% metano!/ 50% agua d) 40% metanol/ 60% agua 1 2 4 4 4 3 2 2 e e '0 '0 'ü 5 'ü u u " " ;>, ;>, .5 .5 o 10 20 30 40 50 Tiempo de retención, min FIGURA 26.14 Efecto de La variación del disolvente en Los cromatogramas. Ana– Lites: 1) 9,10-antraquinona; 2) 2-metil-9,10-antraquinona; 3) 2-etil-9,10-antraqui– nona; 4) 1,4-dimetil-9,10-antraquinona; 5) 2-t-butil-9,10-antraquinona.